Cell Freezing Protocol

Zachovanie cely zmrazovania je pre výskum, veterinárnej medicíny a chovu hospodárskych zvierat, pretože to umožňuje bunkám, ktoré majú byť skladované po dlhú dobu. Zmrazenie Zvolená metóda je však potrebné zabrániť alebo obmedziť poškodeniu bunky. Kryokonzervácia prostriedok a spôsob môže závisieť od typu buniek. Príprava

Bunky by mali byť zmrazené, ak sú zdravé a aktívne rastúce s 90-percentná životaschopnosti. Je potrebné dbať na manipuláciu a vysokorýchlostné odstreďovanie a energický pipetovanie alebo odsávanie je potrebné sa vyhnúť udržať životaschopnosť a zabrániť bunkové poškodenie.
Cryoprotection

cryoprotection agent použitý ako náhrada za intracelulárnej vody. Činidlo zabraňuje ľadových kryštálikov a dehydratácia sa vyskytujúce v bunkách. Sterilizované glycerol a sterilizujú dimetylsulfooxidu sa často používajú v koncentrácii 5 až 15 percent (objem na jednotku objemu) sa zriedi v oboch fetálneho teľacieho séra alebo rastového média, v závislosti od typu bunky.
Tuhnutie a skladovanie
bunky

v mraziacej zmesi by mali byť pomaly ochladí. S programovateľnú mraznička nie je k dispozícii, môže byť zabalený do cryovials tkanive alebo umiestnené v polystyrénu, ktorý môže spomaliť zmrazovania. Bunky by mali byť uchovávané na mínus 80 stupňov Celzia po dobu 24 hodín a potom sa preniesol do kvapalného dusíka pre dlhodobé skladovanie.
Rozmrazovanie

mrazené bunky treba rozmraziť rýchlo. Vodnom kúpeli pri 37 stupňoch Celzia môžu byť použité. Starostlivosť by mala byť prijatá s bunkami uloženými v tekutom dusíku však môže ako tekutým dusíkom zadajte fľaštičky a môže explodovať, na rozmrazovanie. Mraziaca zmes sa riedi v rastovom médiu. Životaschopnosť buniek by mali byť posudzované s farbivom trypánovej modrej a buniek kultivovaných za normálne.