Protokoly retrovírus Infekcia

obsahujúci genóm RNA, ktorý je zapuzdrený v kapsidy a lipidov obálky, retrovírusy obsahujú polypeptidových reťazcov, ktoré pomáhajú prepojiť ich s receptormi v membránach hostiteľských buniek, ktoré nakazili. Vzhľadom k tomu, dedičné Väčšina buniek "informácia zakódovaná v DNA, ktoré retrovírusov je obsiahnutý v RNA, retrovírusy tiež niesť enzýmu reverznej transkriptázy, čo im umožňuje držať hostiteľskej DNA. Niektoré protokoly sú následne v laboratóriách v účelné infekcie DNA bunky s týmito vírusmi. Príprava Laboratórne

niektoré laboratórne vybavenie a zdroje sú nevyhnutné na uľahčenie procesu retrovirusove infekcie. Výbava zahŕňa 1 pipeta pomoc, 1 pipeta-man, 1 tkanivové kultúry kapucňa, 37-stupňov Celzia a 32-stupeň Celzia inkubátory, centrifugu Eppendorf a Dodávky zahŕňajú taniere tkanivové kultúry, jednorazové Pasteur pipety kvalifikované retrovírusu supernatantu filtrom sterilizovaný polybrenu a filtrom sterilizovaný protamínsulfátu.
Príprava bunky na infekciu

Prior k infekcii, musí byť rozdelená cieľové bunky v tkanivovej kultúry dosky a inkubované cez noc v 37 stupňov Celzia inkubátora s piatimi percent CO2. Účelom inkubačnej doby je vytvoriť bunky, ktoré sú 50% prítok. Príprava buniek vopred je potrebné zabezpečiť, aby sa bunky sú optimalizované pre infekčného procesu. Nolan laboratórium na Stanfordskej univerzite odporúča, aby bunka infekcie začínajú vždy začať tým, že nakazí NIH 3T3 buniek pomôcť optimalizovať výsledky testu.
Infikovanej bunky
< p> Po uplynutí inkubačnej doby je, mal by zabezpečiť, výskumníci, že bunky sú obe zdravé a pravého sútoku. Pomocou tkanivové kultúry kryt, je mobilný záležitosť odsaje a vírusové supernatant sa uplatňuje do buniek. Po nanesení doštičku jemne hojdali sem a tam, aby sa zabezpečilo, že je rovnomerne distribuovaný. Bunky sa potom spin-naočkujú vložením do Eppendorfovej odstredivky a odstreďovaním pri 2500 otáčkach za minútu deväťdesiat minút pri teplote 30 stupňov Celzia. Potom by sa mali bunky inkubované pri 32 stupňoch Celzia po dobu jedného až dvoch dní. Vírus je potom nahradený extrahovaných buniek a umiestnená do inkubátora má byť analyzovaný, kdekoľvek tri-sedmdny po počiatočnej nákaze.