Kompetitívny väzby Protokol testu

konkurenčné väzbový test je experiment , ktorý určuje väzbovú kapacitu proteínov alebo chemikálie na špecializované proteínov obsiahnutých na povrchu buniek , tzv receptory . Táto metóda je často používaný v lekárskom výskume , ale je tiež možné určiť , ktoré lieky viažu na receptory a modifikovať aktivitu receptora , čo môže zmeniť správanie buniek . Mobilné Príprava

bunky znovu ponorte do ľadovej fosfátovým pufrom ( PBS ) . Opatrenia koncentrácia proteínu potvrdiť rovnaké hladiny bielkovín pomocou špecializovaného komerčne dostupného testu bielkovín .
Testu

Pridať rádioaktivita značený proteín známy viazať sa na receptor , na ligand , do bunky alebo tkanivá pozastavenie . Pridajte súťažiaci , ktorý je skúška liek alebo proteín pri skúške a inkubujú s rádioaktívnym ligandom a bunkovej suspenzie . Rozsah koncentrácií testovanej drogy by mali byť študované . Po inkubácii samostatný viazaného a neviazaného ligandu a meranie rádioaktivity .
Analýza dát

zvyčajné opatrenia , ktoré budú stanovené , je polovica maximálna koncentrácia, ktorá inhibuje receptor inak známy ako IC50 . Tá sa počíta vynesením koncentrácie na logaritmickej stupnici na osi X grafe , zatiaľ čo os Y predstavuje percento inhibície , sigmoid krivka , ktorá je v tvare S , musí byť generovaný . IC50 je 50 percent inhibícia bod a zodpovedajúce koncentráciu možno odčítať z grafu .