Parafín vkladanie Protokol

Vedci zvyčajne potrebné spevniť biologické vzorky v sekcii je preč. To uľahčuje pre vedcov pridať farbivá, protilátky a sondy pre biologický vzorku. To tiež znižuje prekrývanie rôznych bunkových vrstiev. Vedci používajú parafín ako pevný matice pre rezanie, lebo parafín sa nemiešajú s vodou. Parafín je druh uhľovodíka. Biologické vzorky obsahujú vodu, takže vedci musia vysušenie vzoriek pomocou čoraz viac koncentrovanej etanolu kúpeľa. Xylén

Vedci odstráňte etanol pomocou xylén. Potom teda používajú roztavenú parafín odstrániť xylén. Pre svetelnú mikroskopiu, že parafínové preparáty sú zvyčajne päť um silná. Parafín nie je dostatočne tvrdý na tenšie plátky. Vedci rehydratáciu tkaniva pomocou xylénu, potom etanol. Potom opláchnite biologický vzorku destilovanou vodou, aby sa zabránilo kontaminácii.
Upevňovacie

parafínovej tkaniva sú obvykle fixované neutrálne vyrovnávacej formalínu, čo je komerčný verzia formaldehyd. To zahŕňa paraformaldehydu a metanol, ktorý zabraňuje formaldehyd, previesť do kyseliny mravčej. Tenké plátky tkanivá potrebujú 48 hodín záznamu pri izbovej teplote pre optimálnu histológie, čo je štúdium mikroskopické anatómie. V opačnom prípade bude tkanivo stvrdne a stane krehká. Pred spracovaním je tkanivo zvyčajne uložený v 70 percent etanolu pri teplote 4 stupňov Celzia.
Parafínové procesory

Vedci často používajú parafínové procesory na odoslanie tkaniva prostredníctvom kúpeľov, ktoré sa postupne k vysušeniu materiálu pred horúcou parafín môžete zadať cez tkanív. Vedci spustenie procesora cez noc. Procesor iba ohrieva tkaniva po určitú dobu, v závislosti na tkanive, aby sama o sebe nemá tvrdá a krehká. Procesor používa vákuum, ktoré urýchlia prenikaniu parafínu a odstráni vzduchové bubliny. Po spracovaní, sú uložené v kazetách tkaniva pri izbovej teplote.
Wax topenia

parafín topí po dobu jednej hodiny pred pridaním tkaniva. Celá kazeta je umiestnená do 65 stupňov Celzia parafínového kúpeli po dobu 15 minút. Za studena z hliníka chladič chladí parafín na 20 minút. Ak sú voskové praskliny alebo tkanivá nie sú zarovnané správne, vedec roztaví parafínové a zopakuje.
Rezanie

rezov tkaniva, vedec dostane vodný kúpeľ na 35 až 37 stupňov Celzia. Voda je svieža a deionizovanej. Bloky sú umiestnené lícom nadol na bloku ľadu alebo chladičom po dobu 10 minút. Čepeľ reže blok do sekcií. Dva problémy, ktoré môžu nastať, sú chudobní ribboning a fragmentácii vzorky. Keď sa vzorky fragment, voda je príliš horúca. Či blok nie je páska dobre, mali by ste dal ju späť na bloku ľadu a spevniť vosku pred začatím znova.